实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE)是研究多发性硬化(MS)的重要动物模型。该模型通过模拟自身免疫性T细胞攻击中枢神经系统(CNS),重现了MS的核心病理特征,包括神经炎症、脱髓鞘及神经功能障碍等。因此,EAE模型在多发性硬化的发病机制探究、神经免疫调节药物筛选(如Roflumilast)以及髓鞘修复与神经保护疗法的开发等领域被广泛应用。
尊龙凯时人生就博凭借其专业的研发能力和严格的质量控制体系,推出了一套高稳定性、高重复性的EAE模型研究试剂组合。该组合的核心试剂具备如下优势:
- ✅现货速发:百日咳毒素国内现货,极高纯度(99%),高品质、高性价比。
- ✅高发病率:C57BL/6小鼠免疫后10-14天稳定发病(临床评分2-4分)。
- ✅病理重现性好:明确髓鞘脱失(LFB染色)及Th17细胞浸润(流式验证)。
- ✅多维评价体系:支持临床评分、行为学、组织病理学以及分子生物学的全面验证。
在EAE模型的核心试剂中,包括:
- 免疫原(抗原): MOG₃₅₋₅₅(髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段),来源于人工合成肽。其浓度通常为每只小鼠150-300μg(溶解于PBS、生理盐水或CFA中)。
- 佐剂: 完全弗氏佐剂(CFA),其成分包括矿物油和灭活的结核分枝杆菌(如Mycobacterium tuberculosis H37Ra,浓度为4-5mg/mL)。该佐剂可以增强免疫应答,与MOG₃₅₋₅₅乳化后使用。
- 免疫增强剂: 百日咳毒素(Pertussis Toxin, PTX),建议剂量为200-500ng/只小鼠,通过腹腔注射于免疫当天(Day 0)及第2天(Day 2),以破坏血脑屏障并促进T细胞浸润。
EAE模型的诱导方法包括以下步骤:
- 实验准备: 选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠。每组实验需至少10只动物。动物需在实验环境中适应1周,并保持稳定的温度、湿度和光照条件。同时,将MOG₃₅₋₅₅肽溶解于生理盐水,并与等体积的CFA混合乳化形成均匀的乳剂。
- EAE诱导: 在第0天,配制乳剂,将300µg MOG₃₅₋₅₅肽与300µL CFA混合乳化,分两次(每侧100µL)皮下注射于小鼠的双侧腋窝、腹股沟和背部。同时腹腔注射200ng PTX。
- 在第2天,再次进行PTX注射,重复腹腔注射200ng PTX。
EAE模型的验证需要通过临床评估、行为学、组织病理学及分子生物学等多维度的方法进行。验证的方法包括临床评分(使用标准化评分系统0-5分量表)、体重监测、运动功能评估(转棒实验、步态分析)、抑郁样行为检测、组织病理学检查以及分子生物学分析等。
通过这些方法,EAE模型的成功标准包括发病率达到80%(临床评分≥2),并在病理上确认炎性浸润和髓鞘脱失。与此同时,对于分子标志物的检测能进一步验证模型的有效性,强调了尊龙凯时人生就博在生物医学研究中的应用潜力。
未来,随着进一步的研究结果揭示MS及其相关疾病的发病机制,预计会有更多创新的治疗策略出现。科研人员可依据此模型探索类似Roflumilast等药物的潜在效果,从而推动多发性硬化及相关抑郁症状的治疗进展。